Endring av filtreringstemperatur ved kvantitering av fritt valproat i serum på UPLC-MS/MS
Description
Full text not available
Abstract
I denne oppgaven ble det undersøkt om metoden for kvantifisering av fritt valproat i serumkan optimaliseres med tanke på effektivitet og sammenlignbarhet. Valproat er et legemiddelsom brukes i behandling av epilepsi og bipolar lidelse, og detekteres ved hjelp av UPLCMS/MS. Intensivpasienter har økt risiko for å få lavere nivå av serumalbumin, derfor erterapikontroll av fritt valproat i serum hos denne pasientgruppen viktig for å unngå overdoseog forgiftning. Formålet med oppgaven er å undersøke om konsentrasjonen av fritt valproatpåvirkes under prøveopparbeidelsen ved filtrering i romtemperatur versus kroppstemperatur.
Det ble gjennomført en enkel validering som innebar bestemmelse av nøyaktighet ogpresisjon av fritt og totalt valproat i kontroller, sammenlignende laboratorieprøver ogpasientprøver. I tillegg ble det utført en metodesammenligning der avvik mellom metodeneble undersøkt ved ulik filtreringstemperatur.
Resultatene viste at presisjon og nøyaktighet for de interne kontrollene var innenforakseptkriteriene, som henholdsvis var CV ≤ 10,0% for repeterbarhet, CV ≤ 15,0% forreproduserbarhet og avvik ≤ 15,0% for nøyaktighet. Repeterbarheten for totalt valproatvarierte fra 3,1-5,7% og for fritt valproat varierte den fra 2,8-4,0%. Reproduserbarhet fortotalt valproat varierte fra 5,5-7,9% og for fritt valproat varierte denne fra 3,5-9,3%.Nøyaktighet for totalt valproat varierte fra -2,7-2,7%. For de sammenlignendelaboratorieprøvene var krav til nøyaktighet satt til |Z| ≤ 2, der de utregnede Z-verdiene variertefra -1,4-2,1 for fritt valproat og for totalt valproat fra 2,8-3,6. CV ble utregnet til 10,0% forfritt valproat og for totalt valproat utregnet til 1,5%. Metodesammenligningen viste at det varen proporsjonal og konstant forskjell mellom metodene, der filtrering i romtemperatur ga igjennomsnitt 12,6% lavere konsentrasjon.
Undersøkelsen i sin helhet indikerte at prøveopparbeidelsen av valproat kan gjennomføres vedfiltrering i romtemperatur. Denne metoden gav resultater som var lavere enn ved filtrering ikroppstemperatur. Samtidig ble metoden effektivisert og resultatene ble mer sammenlignbaremed andre laboratorier, da flere filtrerte i romtemperatur fra før. In this study, an examination was conducted to optimize a method for quantifying freevalproate in serum, with a focus on enhancing efficiency and comparability. Valproate, amedication utilized in the treatment of epilepsy and bipolar disorder, is detected throughUPLC-MS/MS analysis. Given the elevated risk of decreased albumin levels among criticalcare patients, it is crucial to monitor levels of valproate in serum for this patient group toavoid overdose and poisoning. The purpose of this study is to examine if the concentration offree valproate in serum is influenced by the temperature at which filtering occurs duringsample processing, comparing room temperature to body temperature.
A simplified validation was implemented, which included the determination of accuracy andprecision of free and total valproate in controls, comparative laboratory samples and patientsamples. Additionally, a method comparison was conducted to evaluate deviation between thetwo methods.
The results showed that the precision and accuracy of internal controls met the acceptancecriteria, which was respectively CV ≤ 10,0% for repeatability, CV ≤ 15,0% for reproducibilityand deviation ≤ 15,0% for accuracy. Repeatability ranged between 3,1-5,7% for totalvalproate and between 2,8-4,0% for free valproate. The reproducibility ranged between 5,5-7,9% for total valproate and for free valproate it varied between 3,5-9,3%. Accuracy for totalvalproate varied between -2,7-2,7%. The comparative laboratory samples were assessed withaccuracy criteria set at |Z| ≤ 2. The calculated Z-values ranged from -1,4-2,1 for free valproateand 2,8-3,6 for total valproate. CV was determined to be 10,0% for free valproate and 1,5%for total valproate. Method comparison revealed a consistent and proportional differencebetween the two methods, with filtering at room temperature resulting in an averageconcentration that was 12,6% lower.
This study uncovered that processing valproate samples through room temperature filteringyields lower results compared to body temperature filtering. These results also showed a morecomparable method with other laboratories, as the majority already use the filtering method atroom temperature.