Effekter Ivermectin har på celleproliferasjon og uttrykkning av IL-23A til Caco-2 celler

Abstract

Målet med denne studien var å undersøke om genuttrykket av IL-23 ble opp- eller nedregulert i Caco-2 celler som har vært inkubert med Ivermectin i vekstmediet i forhold til Caco-2 celler inkubert under like forhold, men uten Ivermectin i vekstmediet (kalt kontrollceller videre). Bakgrunnen for studien er tidligere forskningsartikler som viser at Ivermectin hemmer celleproliferasjonen til forskjellige kreftceller. Det ble studert tre tidsintervaller for inkubasjon, 24 timer, 48 timer og 72 timer. 6 celleflasker ble studert for hvert tidsintervall, 2 celleflasker for kontrollceller, og 4 celleflasker for Caco-2 celler med Ivermectin i vekstmediet under inkubasjon. Konsentrasjonen av Ivermectin som ble benyttet i studien var 10,0 µM. To-trinns RT-qPCR ble benyttet for å studere genekspresjonen. Endring i genekspresjon ble beregnet ved å benytte ∆∆Ct-metoden, med referansegen og statistisk analyse av resultatene. Det ble observert forskjeller for celleproliferasjon og resultater fra qPCR-analysen viser en oppregulering av IL-23 i Caco-2 celler inkubert med Ivermectin i vekstmediet etter 48 timer. Det var tydelig lavere celleproliferasjon for celler inkubert med Ivermectin etter 72 timer, i forhold til celler inkubert i 72 timer uten Ivermectin. Verdiene fra resultatene var ikke statistisk signifikante. En svakhet med denne oppgaven var mangel på resultater fra qPCR-analysen for noen av prøvene, og at det var for få paralleller for de ulike prøvene for å kunne si noe om repeterbarheten for forsøket.

The aim of this study was to investigate if the expression of IL-23 was up- or downregulated in Caco-2 cells that had been incubated with Ivermectin in the growth medium compared to Caco-2 cells incubated under the same conditions, but without Ivermectin in the growth medium (hereby referred to as control cells). The background for the study is previous research articles that indicate that Ivermectin affects cell proliferation of different types of cancer cells. Three time-intervals were studied, 24 hours, 48 hours, and 72 hours. 6 cell flasks were studied for each interval, 2 cell flasks for control cells, and 4 cell flasks for Caco-2 cells with Ivermectin in the growth medium during incubation. The concentration of Ivermectin used in the study was 10,0 µM. Two-step RT-qPCR was utilized to study the gene expression. Change in gene expression was calculated by using the ∆∆Ct-method, with reference genes and statistical analysis of the results. It was observed difference in cell proliferation and results from the qPCR-analysis shows an upregulating in the gene expression of IL-23 in the Caco-2 cells incubated with Ivermectin in the growth medium after 48 hours. The cell proliferation was clearly lower for cells incubated with Ivermectin for 72 hours, compared to the cells incubated for 72 hours without Ivermectin. Values from the results were not statistically significant. A weakness of this study was the lack of results from some of the samples from the qPCR analysis, and that it was too few parallels for each sample to comment on the repeatability of the experiment.