Validering av ny metode for måling kalprotektin i feces på nytt analyseinstrument

Abstract

Denne bacheloroppgaven handler om å validere ny metode, OC-FCa Reagent for måling av kalprotektin i feces på nytt analyseinstrument, OC Sensor Pledia som er produsert av Eiken Chemicals. Oppgaven ble gitt av Avdeling for medisinsk biokjemi ved St. Olavs hospital. Hensikten med å ta i bruk ny metode for måling av fekalt kalprotektin var for å effektivisere driften av analysen i laboratoriet.

Hensikten med validering var å sikre at OC-FCa Reagent og instrumentet OC Sensor Pledia oppfyller produsentens angivelser for riktighet og presisjon. Metodevalidering ble utført ved å sette først kvalitetsmål for analysen basert på leverandørens oppgitte verdier for riktighet og presisjon. Deretter ble analytisk kvalitet vurdert etter kvalitetsmålet som er satt på forhånd. Metodens presisjon ble undersøkt ved å teste repeterbarhet og reproduserbarhet for analysen. Metodens riktighet ble undersøkt ved å sammenligne resultatene med leverandørens oppgitte verdier for OC-FCa Kontroll LV1, LV2 og LV3.

Intern kvalitetskontroller OC-FCa Kontroll LV1, LV2 og LV3, ble analysert med to replikater per dag i 20 dager. Målte verdiene for de 20 parallellene til hver kontroll nivå, ble brukt til å beregne resultatene for presisjon og riktighet. I tillegg ble det også analysert seks ekstern kvalitetskontroller, men de ble ikke tatt med i vurderingen. Ekstern kvalitetskontrollene ble analysert bare får å få generell vurdering av kalprotektin i feces analyse på OC Sensor Pledia.

Resultatene for presisjon viste at reproduserbarhet var betydelig god, hele 90% konfidensintervall for oppnådd CV reproduserbarhet ble lavere enn leverandørens oppgitte verdier for OC-FCa Kontroll LV1, LV2 og LV3. Repeterbarhet ble også god i forhold til oppgitt verdi ettersom ingen av kontrollene overskredet kravene for repeterbarhet. For LV1 og LV2 var hele 90%konfidensintervall for oppnådd CV repeterbarhet lavere enn oppgitte verdier. For LV3 var nedre grense for 90% konfidensintervall for oppnådd CV repeterbarhet lavere enn oppgitte verdier.

Resultatene for riktighet viste at hele 90% konfidensintervall for gjennomsnittene til alle OC-FCa Kontrollene ligger innenfor leverandørens oppgitte akseptområder. Dermed ble også metodens riktighet betydelig god. OC Sensor Pledia har oppfylt kvalitetsmål basert på leverandørens oppgitte verdier for riktighet og presisjon for måling av fekalt kalprotektin.

This bachelor thesis is about validating a new method, OC-FCa Reagent for measuring calprotectin in faeces on a new analytical instrument, OC-SENSOR PLEDIA which is produced by Eiken Chemicals. The assignment was set by the Department of Medical Biochemistry at St. Olavs Hospital. The purpose of adopting a new method for measuring faecal calprotectin was to streamline the operation of the analysis in the laboratory.

The purpose of validation was to ensure that OC-FCa Reagent and the instrument OC-Sensor Pledia meet the manufacturer´s specifications for accuracy and precision. Method validation was performed by first setting quality measures for the analysis based on the supplier's stated values for accuracy and precision. Analytical quality was then assessed according to the quality measures set in advance. The precision of the method was examined by testing the repeatability and reproducibility of the analysis. The accuracy of the method was examined by comparing the results with supplier´s stated values for OC-FCa Control LV1, LV2 and LV3.

Internal quality control OC-FCa Control LV1, LV2 and LV3, were analyzed with two replicates per day for 20 days. Measured values for the 20 parallels to each control level were used to calculate the results for precision and accuracy. Furthermore, six external quality controls were also analyzed, but they were not included in the assessment. External quality controls were analyzed only to get a general assessment of calprotectin in faeces analysis on OC Sensor Pledia.

The results for precision showed that reproducibility was significantly good, the entire 90 % confidence interval for achieved CV reproducibility was lower than the supplier´s stated values for OC-FCa Control LV1, LV2 and LV3. Repeatability was also good in relation to the stated value, none of the controls exceeded the requirements for repeatability. For LV1 and LV2, the entire 90% confidence interval for achieved CV repeatability was lower than stated values. For LV3, the lower limit for the 90% confidence interval for achieved CV repeatability was lower than stated values.

The results for accuracy showed that the entire 90% confidence interval for the averages of all OC-FCa Controls lies within the supplier's stated acceptance ranges. As follows, the accuracy of the method was also considerably good. OC Sensor Pledia has met quality measures based on the supplier's stated values for accuracy and precision for measuring calprotectin in faeces.