| dc.description.abstract | Hematopoietiske stamceller (HSCs) er ansvarlig for den livslange produksjonen av alle blodceller og defineres av sin kapasitet til å rekonstruere hele blodsystemet til en mottaker etter HSC transplantasjon. På grunn av denne unike egenskapen brukes HSC transplantasjon som behandlingsform mot flere blodsykdommer, slik som akutt myelogen leukemi (AML). HSCs kan isoleres basert på deres overflateproteinuttrykk. Likevel, for å forbedre vår forståelse for HSC-biologi og for å tillate bedre vurdering av kapasiteten til HSC transplantat, trengs mer sofistikerte kombinasjoner av overflatemarkører slik at deres immunfenotype videre kan raffineres. Det har blitt vist at Endomucin (EMCN) er høyt uttrykt på overflaten til murine og humane HSCs og at HSCs er mer frekvent i cellepopulasjoner isolert basert på EMCN-uttrykk. I tillegg uttrykkes ikke EMCN på AML-kreft-celler som gjør at markøren kan brukes til å isolere AML-frie HSC-transplantat fra AML-pasienter for autolog transplantasjon. Dette gjør EMCN til en ny lovende HSC- markør. For å undersøke funksjonen til EMCN i murine HSCs, ble en ny betinget Emcn knock out (KO) modell brukt til å studere den funksjonelle konsekvensen av EMCN-tap i murin hematopoiese. Etterfulgt av induksjon av KO, ble frekvensen av perifere blod (PB) celler, modne beinmarg (BM) celler, og HSCs sammenliknet i EMCN KO mus og EMCN villtype (WT) mus. HCS cellesyklusanalyse ble også gjennomført, før EMCN KO og EMCN WT HSCs ble transplantert i dødelig bestrålte mus for å studere effek- ten av EMCN KO pa HSCs sin rekonstruerende kapasitet. Dessverre ble det gjennom eksperimentene tydelig at hverken EMCN KO mus eller de tiltenkte EMCN WT musene uttrykte EMCN, og derfor kunne ingen forskjell mellom musene forventes. Likevel viste transplantasjonsforsøkene at EMCN KO HSCs kan regenerere the hematopoietiske sys- temet til dødelig bestrålte mus. Dette indikerer at EMCN ikke er essensiell for HSCs sin kapasitet til hematopoietisk rekonstruksjon. Til tross for dette må eksperimentene gjentas med en fungerende EMCN WT kontroll for at konklusjoner skal kunne trekkes angående funksjonen til EMCN i HSCs. | |
| dc.description.abstract | Hematopoietic stem cells (HSCs) are responsible for the lifelong production of all blood cells and are defined by their capacity to hierarchically reconstitute the entire blood system of a recipient following HSC transplantation. Due to this unique feature, HSC transplantation is used to treat various blood disorders, such as acute myeloid leukemia (AML). HSCs can be prospectively isolated based on their surface protein expression. However, to improve our understanding of HSC biology and to allow better assessment of HSC graft capacities, more sophisticated marker combinations are needed to further refine their immunophenotype. It has been reported that Endomucin (EMCN) is highly expressed on the surface of murine and human HSCs and that it enriches for immunophenotypic HSCs. Additionally, EMCN is not expressed by AML cancer cells, making the marker applicable for purifying tumor-free HSC grafts from AML patients for autologous transplantation. The latter statements make EMCN a promising new HSC marker. To investigate the function of EMCN in murine HSCs, a novel Emcn conditional knock-out (KO) model was used to study the functional consequence of EMCN-loss on murine hematopoiesis. Following the induction of the KO, the frequency of peripheral blood (PB) cells, mature bone marrow (BM) cells, and HSCs was compared in the EMCN KO and the EMCN wild-type (WT) mice. HSC cell cycle analysis was also conducted before EMCN KO and EMCN WT HSCs were transplanted into lethally irradiated mice to study the effect of the KO on HSCs’ repopulating capacity. Unfortunately, during experiments, it became evident that neither the EMCN KO mice nor the intended EMCN WT control mice expressed EMCN, and therefore, no differences could be expected between the two groups. However, the transplantation assays revealed that EMCN KO HSCs can regenerating the hematopoietic system of lethally irradiated recipients, indicating that EMCN is dispensable for the re-constitutional capacity of HSCs. However, to draw any conclusions regarding the function of EMCN in HSCs, the experiments need to be repeated with a proper EMCN WT control. | |
