Beregning av fritt kalsium i serum; hvilken betydning har valg av albuminmetode?

Abstract

Konsentrasjonen av fritt kalsium i fullblod og i plasma bestemmes ved bruk av Ca2+-ion-selektive elektroder. Dette er en manuell og ressurskrevende analyse. Flere laboratorier har utarbeidet indirekte metoder for å beregne konsentrasjonen av fritt kalsium. Metodene baserer seg på målte konsentrasjoner av totalkalsium relatert til albuminkonsentrasjonen i den aktuelle prøven. Ved St. Olavs hospital Avdeling for Medisinsk Biokjemi (AMB) benyttes rutinemessig en kolorimetrisk metode for analyse av totalkalsium, og en kolorimetrisk metode med fargestoffet bromkreosolgrønn (BCG) for analyse av albumin. BCG- metoden er kjent for å overestimere verdiene av albumin ved lave konsentrasjoner. I dette bachelorprosjektet ble det undersøkt om en immunologisk metode (nefelometri) for bestemmelse av albumin kunne gi bedre presisjon i beregningen av fritt kalsium. Videre ble det undersøkt om flere analyseparametere (kreatinin, kjønn og alder) kunne påvirke beregningen av fritt kalsium. Fritt kalsium verdier fra 509 blodprøver ble innhentet. Albuminkonsentrasjonen ble analysert ved kolorimetrisk og immunologisk metode. Funnene viste at den kolorimetriske metoden (BCG) overestimerte albuminkonsentrasjoner ved lave albuminkonsentrasjoner. Både immunologisk og kolorimetrisk metode hadde relativt stor spredning i måleresultatene. For pasienter med lave albuminkonsentrasjoner (< 40g/L) viste beregningen av fritt kalsium noe bedre presisjon ved bruk av immunologisk metode for bestemmelse av albumin. Analyse av fritt kalsium med en Ca2+-ion-selektive elektrode er fortsatt den beste pålitelige metoden for måling av fritt kalsium, spesielt ved lave albuminverdier i prøven.

The concentration of ionized (free) calcium in blood is measured by Ca2+-ion-selective electrodes. This is a manual and time-consuming analysis. Several laboratories have developed indirect methods for calculating the concentration of ionized calcium. The methods are based upon measurement of total calcium concentration (i.e bound and free) related to the albumin concentration of the particular sample. At St. Olav`s University Hospital, Dept. of Medical Biochemistry (AMB) a colorimetric method is utilized for the assessment of total calcium, and a colorimetric method with bromocreosol green coloring agent (BCG) for measurement of albumin concentrations. The BCG- method is assumed to overestimate the values of albumin in samples with low concentrations. Thus, in this bachelor project we examined whether an immunologic method (nephelometry) for albumin measurement could give better precision when calculating ionized calcium. Further we examined whether the creatinine concentration in blood, age or gender could influence the calculation of ionized calcium. Ionized calcium values from 509 blood samples were recovered. The concentration of albumin was analyzed with both colorimetric (BCG) and immunologic (nephelometry) methods. The findings showed that the colorimetric method (BCG) overestimated albumin concentrations at lower albumin concentrations. Both immunological and colorimetric methods had a relatively large dispersion in the measurement results. Patients whit low albumin concentrations (<40 g/L) the calculations of free calcium showed somewhat better precision using the immunological method of determination of albumin. Analysis of free calcium whit Ca2+-ion-selective electrode remains the best reliable method for measuring free calcium, especially at low albumin values in the sample