Optimalisering av metode for bestemmelse av fettsyrer i blodplasma ved hjelp av gasskromatografi.

Abstract

Målet med denne oppgaven har vært å optimalisere en metode for å kunne bestemme fettsyrer i blodplasma ved hjelp av gasskromatografi. Fettsyrene ble omdannet til fettsyremetylestere før separering og kvantifisering på gasskromatograf. I forsøkene er det brukt blodplasma fra to individer. I prosjektet er det benyttet HCl-katalysert metylering, og oppgaven har hovedsakelig tatt for seg optimalisering av denne metoden. Optimalisering ble gjort ved ulike tilnærminger i form av mengde katalysator, tid og temperatur i varmebad. Holdbarhet på blodprøver og ferdig opparbeidede prøver ble testet ved ulike lagrings og fryseforsøk. Resultatene viser at metoden hvor det ble benyttet 2 ml HCl/metanol som katalysator ga størst utbytte av fettsyrer. Tiden i varmebad (1,5 time) var 90 °C. Ved lagring av opparbeidede prøver ser man også at sammensetningen av fettsyrer er mer stabil ved bruk av 2 ml HCl/metanol. Blodprøvene ser ikke ut til å ta skade ved en fryse- og tineprosess, mens dobbeltfrysing påvirker fettsyresammensetningen i form av nedbryting.