Utvidet studie av PLA2-uttrykk i HaCaT-keratinocytter: .

Abstract

I denne masteroppgaven har det blitt utviklet primerpar for 17 humane PLA2-isotyper. Ved hjelp av primerene har vi påvist uttrykk av 17 PLA2-isotyper i HaCaT-keratinocytter, hvorav 11 av disse representerer førstegangspåvisninger i HaCaT. Funnene representerer økt kunnskap om PLA2-familien og viser at HaCaT uttrykker et mangfold av PLA2-isotyper. Primerene ble også benyttet til å kartlegge PLA2-uttrykk gjennom keratinocytters differensiering. Resultatene viser at 13 av 17 isotyper uttrykkes gjennom hele differensieringsprosessen, som indikerer at PLA2-enzymer spiller sentrale roller i lipidmetabolisme i human epidermis. PLA2G2A viste, som den eneste av de studerte isotypene, sterk oppregulering under differensieringen, som vitner om at enzymet kan spille en viktig rolle i de øvre strata i epidermis.Sammendrag Under utviklingen av primerparene ble human postnatal placenta tatt i bruk som antatt positiv kontroll for uttrykk av samtlige PLA2-isotyper. 8 av 17 primerpar detekterte mRNA i placenta, hvorav PLA2 gruppe 2D, 4C, 4D og 10 representerer førstegangspåvisninger i human placenta. Sammendrag Primerene utgjør et verktøy som gjør det mulig å kartlegge PLA2-uttrykk i alle humane celler og vev. Da diverse PLA2-isotyper har blitt vist å spille en sentral rolle i inflammasjonssykdommer ved å katalysere hydrolysen av arakidonsyre fra glyserofosfolipider, vil det være intressant å kartlegge PLA2-uttrykk i friskt vev versus betent vev. Primerene vil legge grunnlaget for økt forståelse av de mange PLA2-enzymenes funksjoner i inflammasjonssammenheng, og potensielt legge grunnlag for utvikling av målrettede medisiner mot kronisk inflammatoriske sykdommer.