Vis enkel innførsel

dc.contributor.advisorJohansen, Berit
dc.contributor.advisorBrekke, Ole-Lars
dc.contributor.advisorFure, Hilde
dc.contributor.advisorMollnes, Tom Eirik
dc.contributor.authorLandsem, Anne
dc.date.created2012-05-25
dc.date.issued2012
dc.identifierntnudaim:6892
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11250/2400483
dc.description.abstractSepsis er fortsatt en alvorlig tilstand med høy mortalitet, til tross for mange år med intens forskning. Ved sepsis er det en systemisk inflammasjonsreaksjon som involverer komplement, koagulasjons- og kallikrein-kininsystemet. Den økte prokoagulante tilstanden som blant annet skyldes økt uttrykk av vevsfaktor (TF) vil bidra til disseminert intravaskulær koagulasjon (DIC) og organsvikt. Det ble i denne studien undersøkt hvilken effekt C1-inhibitor (C1-INH) har på koagulasjonsaktiveringen ved Gram-negativ sepsis i en human fullblodsmodell. C3 hemmeren compstatin ble brukt for å sammenligne effekten av C1 INH med en ren komplementhemmer. Dette gjorde det mulig å studere om koagulasjonsaktiveringen i modellen er komplementmediert. Det ble benyttet en godt etablert human fullblodsmodell med E. coli og renset lipopolysakkarid (LPS) fra Escherichia coli (E. coli) som stimuli. Antikoagulanten lepirudin ble benyttet. Denne har ingen innvirkning pår komplementaktiveringen og hemmer koagulasjonsaktiveringen ved å hemme trombin direkte. Prøvene ble inkubert med stimuli og hemmere i 60 eller 120 minutter. Koagulasjonsaktiveringen ble målt som protrombin faktor 1 og 2 (protrombin F1+2) med ELISA. Relativ ekspressjon av TF mRNA ble bestemt ved hjelp av RT-qPCR. Det ekstracellulære TF uttrykket på bla. monocytter ble målt ved hjelp av flowcytometri. Aktiviteten av TF i plasma mikropartikler ble bestemt med en enzymatisk metode. Det terminale komplement komplekset (TCC) og lang pentraxin 3 (PTX3), en inflammatorisk mediator, ble målt med ELISA. En rekke (27) cytokiner i plasma ble analysert med multiplex teknologi. Både C1-INH og compstatin hemmet effektivt koagulasjonsaktiveringen målt som protrombin F1+2 etter tilsetting av E. coli og LPS i humant fullblod. Både E. coli og LPS stimuli ga økt nivå av membranbundet TF på overflaten av monocytter, TF mRNA og TF aktivitet i plasmamikropartikler. Denne økningen av TF ble effektivt redusert av C1-INH. Compstatin hemmet til sammenligning TF mRNA oppregulering og TF uttrykket på monocytt-overflaten, men ga en ikke-signifikant hemming av TF funksjon i plasmamikropartikler. E. coli indusert komplementaktivering målt som TCC ble også effektivt redusert både av C1-INH og compstatin. C1-INH reduserte syntesen av PTX3 og cytokiner, mens compstatin til sammenligning kun reduserte IL 8 nivået. Inaktivert C1-INH reduserte også E. coli og LPS-indusert koagulasjonsaktivering. Resultatene viser at C1-INH i høye konsentrasjoner kan redusere E. coli og LPS-indusert oppregulering av TF og koagulasjonsaktivering. Compstatin reduserte også E. coli og LPS-indusert oppregulering av TF uttrykk og koagulasjonsaktivering. Dette kan indikere at komplementaktivering spiller en viktig rolle for koagulasjonsaktiveringen under en Gram -negativ sepsis.
dc.languagenob
dc.publisherNTNU
dc.subjectCellebiologi for medisinsk/teknisk personell
dc.titleEffekten av C1-inhibitor på E.coli- og LPS-indusert "tissue factor" i humant fullblod
dc.typeMaster thesis


Tilhørende fil(er)

Thumbnail
Thumbnail

Denne innførselen finnes i følgende samling(er)

Vis enkel innførsel