Holdbarhetsundersøkelse av kortisol i usentrifugerte spyttprøver ved bruk av LC/MS-MS-metode

Abstract

Seksjon for spesiell biokjemi, Avdeling for medisinsk biokjemi ved St. Olavs hospital ønsker å undersøke holdbarheten av kortisol i usentrifugerte spyttprøver ved bruk av LC/MS-MS-metode da dette er sentral kunnskap som kommer til nytte ved oppbevaring av prøver. Av tidligere studier på dette feltet er det få som har brukt LC/MS-MS som metode, ei heller et stort nok antall prøvedonorer. Disse faktorene danner bakgrunnen for gjennomførelse av denne studien.

I gjennomføringen av kvalitetssikringsprosjektet ble det samlet inn duplikate spyttprøver fra frivillige deltakere som ble oppbevart i varierende antall dager i enten romtemperatur eller kjøleromtemperatur. Analyseringen av kortisol ble utført på LC/MS-MS. Resultatene ble tolket ved bruk av batch-metoden, og det ble i tillegg laget flere illustrative figurer og tabeller for å fremstille studiens funn.

Av resultatene i denne studien kommer det frem at usentrifugerte spyttprøver som er blitt oppbevart i 3 og 4 dager i romtemperatur overholder kravene for holdbarhet ved analysering av kortisol, men dette er ikke tilfellet for prøver oppbevart i 5 og 6 dager. For kjøleromtemperatur opprettholdes holdbarheten i både 4 og 7 dager. Disse funnene er basert på normale kortisolverdier som forekommer av et prøveantall på 250 fra totalt 96 prøvedonorer.

Med tillatt bias på 10 % og tillatt totalfeil på 22 % kan man konkludere med at holdbarheten strekker seg til 4 dager i romtemperatur og 7 dager i kjøleromtemperatur for kortisol i usentrifugerte spyttprøver. Stabilitet over lengre tid er gunstig med tanke på situasjoner der prøvetakingen foregår i eget hjem og sendes til lab som postprøve.

Section for Special Biochemistry, Department of Medical Biochemistry at St. Olavs hospital, Trondheim University Hospital aims to study the stability of cortisol in uncentrifuged salivary samples using LC/MS-MS. The results may be important regarding storage of samples for longer periods of time. Previous studies on the subject have used different analysis methods, different equipment and may lack adequate statistical certainty. This forms the basis for conducting the study.

During the conduct of the study, salivary samples in duplicates were collected from volunteers and stored in a varying number of days in either room temperature or refrigerated conditions. The analysis of cortisol was performed using LC/MS-MS. The results were processed using the batch method and presented using figures and tables.

Based on the results from the study, cortisol analysed in uncentrifuged samples stored for 3 and 4 days in room temperature meet the stability requirements, while samples stored for 5 and 6 days do not. For cortisol in samples stored in 4 and 7 days in refrigerated conditions, the stability is maintained. These findings are based on normal values of cortisol from a total of 250 samples collected from 96 individuals.

In conclusion, cortisol in uncentrifuged salivary samples is stable for up to 4 days in room temperature and 7 days in refrigerated conditions with an allowed bias of 10 % and total error allowed of 22 %. Adequate stability of cortisol over longer periods of time is an advantage in situations where samples are taken by patients in their own home before they are sent to the lab for analysis.