Holdbarhet av protein C og APC-resistens i plasma og fullblod ved romtemperatur og frysetemperatur.

Abstract

Denne bacheloroppgaven er en holdbarhetsstudie av protein C og APC-resistens. Målet var å undersøke om frysing påvirker aktiviteten til protein C og APC-resistens etter oppbevaring i romtemperatur i ett døgn. Disse to analysene gjennomføres på plasma tilsendt fra eksterne legekontor på ukentlig basis ved Ålesund Sykehus. Det var ønskelig fra Ålesund Sykehus og Norges teknisk-naturvitenskapelige universitet i Ålesund for å undersøke om nåværende prosedyre for oppbevaring av prøvene før analyseringen er akseptabel ovenfor stabiliteten i citratplasmaet.

Det ble tatt to citratglass av hver av de 27 deltakerne. De ble delt opp slik at en del ble oppbevart i citratfullblod og resten ble avpipettert og analysert rett etter sentrifugering i plasma. Prøvene ble analysert igjen 8 timer etter prøvetakingen, og enda en gang etter 24 timer. Ved siste analyse ble både citratplasma og citratfullblod analysert. Forsøket ble utført etter kriteriene, basert på biologisk variasjon, som totalfeil på 9,9 % og 2,4 % for protein C og APC-resistens, respektivt, og tillat bias for protein C på 4,4 % og APC-resistent på 1,2 %.

Resultatet ble at protein C har en holdbarhet på over 24 timer ved romtemperatur i både citratplasma og citratfullblod. Derimot viser analyseresultatene av APC-resistens at prøvematerialer ikke er holdbare under de samme betingelsene ved analysering etter 8 timer i romtemperatur og at det er dårligere holdbarhet i citratfullblod. Den gjennomsnittlige endringen for APC-resistens i citratplasma var 2,36 %.

Eksponering for frysetemperaturer over tid viser at frysing påvirker holdbarheten til protein C negativt, men viser seg til å ha en litt bedre evne til å bevare holdbarheten til APC-resistens. Prosedyrene for oppbevaring av protein C og APC-resistens ved Ålesund sykehus er ikke akseptable om en baserer holdbarhetskriteriene kun på biologisk variasjon, men at praksisen i dag kan bli ansett som akseptabel om holdbarheten blir basert på kriteriene for klinisk relevante endringer.

This bachelor's thesis is a stability study of protein C and APC resistance. The aim was to determine whether freezing affects the activity of protein C and APC resistance after storage at room temperature for one day. These two analyses are performed on plasma sent from general practitioners’ offices on a weekly basis at Ålesund Hospital. It was requested from Ålesund Hospital and the Norwegian University of Science and Technology in Ålesund to investigate whether the current procedure for storing the samples before analysis is acceptable for the stability of the citrate plasma.

Two citrate tubes were taken from each of the 27 participants. Tubes were divided so that some were stored in citrate whole blood and the rest was pipetted and analyzed immediately after centrifugation. The samples were reanalyzed eight hours after sampling, and one more time after 24 hours. After 24 hours, both citrate plasma and citrate whole blood were analyzed. The experiment was carried out according to the criteria of total error of 9.9 % and 2.4 % for protein C and APC resistance, respectively, and allowable bias for protein C of 4.4 % and APC resistance of 1.2 %.

The result was that protein C is stable over 24 hours at room temperature in both citrate plasma and citrate whole blood. However, the APC resistance analysis results show that the sample materials are not stable under the same conditions when analyzed after 8 hours at room temperature, and that there is worse stability in citrate whole blood with an average change of 2.82 %. Exposure to freezing temperatures over time shows that freezing negatively affects the stability of protein C but appears to have a slightly better ability to preserve the stability of APC resistance. The storage procedures for protein C and APC resistance at Ålesund Hospital are not acceptable if the stability criteria are based solely on biological variation, but the current practice may be considered acceptable if stability is based on the criteria for clinically relevant changes.