Validering av metode for kvantifisering av amfetaminer i serum ved bruk av ny detektor, Xevo TQ-XS, på UPLC-MSMS

Abstract

Validering av metode for kvantifisering av amfetaminer (amfetamin, metamfetamin, 2,3-metylendioksyamfetamin (MDA) og 2,3-metylendioksymetamfetamin (MDMA)) og ritalinsyre i serum ved bruk av ny detektor, Xevo TQ-XS, på en Ultra Performance Liquid Chromatograph Tandem Mass Spectrometre (UPLC-MS/MS) har blitt gjennomført. Xevo TQ-XS har sammenlignet med eldre detektor, Xevo TQ-S, en høyere sensitivitet da den fragmenterer færre ioner og flere ioner når dermed spenningsmåleren. Forenklet validering ble utført ved å teste metodens linearitet, nedre kvantifiseringsgrense, reproduserbarhet, nøyaktighet, matrikseffekter, robusthet og internstandard-recovery. I tillegg ble det gjennomført en direkte sammenligning mellom detektorene ved å teste samsvar mellom instrumentene. Målingene fra Xevo TQ-XS ble vurdert ut fra valideringskrav satt av laboratoriets forskning og utviklings-seksjon, etter internasjonale standarder. Forsøkene viste at med ny detektor, holder metoden høy grad av linearitet (R>0,9998) innenfor analyttenes måleområder, og nedre deteksjonsgrense kan beholdes med signal/noise-ratioer godt innenfor kravene. Dessuten ser man at både nøyaktigheten og reproduserbarheten for metoden innfrir alle krav. Med internstandard-korrigering, er det tilnærmet ingen matrikseffekter og robustheten tilfredsstiller alle krav for forskyvning av areal innad i analyseseriene. Man ser også variasjon av internstandard-areal som ligger godt innenfor det som er definert som akseptable avvik etablert med tidligere detektor. I tillegg viser den direkte sammenligningen mellom instrumentene, ved bruk av regresjonsplot, at det er ingen tegn til systemiske avvik mellom detektorene når det gjelder nøyaktighet. Enkelt valideringsforsøk har vist at detektoren Xevo TQ-XS er klar til kvantifisering av amfetaminer og ritalinsyre i serum på UPLC-MS/MS

Validation of methods for quantification of amphetamines (amphetamine, methamphetamine, 2,3-methylenedioxyamphetamine (MDA) and 2,3-methylenedioxymethamphetamine (MDMA)) and ritalinic acid in serum using a new detector, Xevo TQ-XS, on an Ultra Performance Liquid Chromatograph Tandem Mass Spectrometer (UPLC-MS/MS) has been carried out. Compared to the previous detector, Xevo TQ-S, the new Xevo TQ-XS is more sensitive as fewer ions are fragmented thus more of them reach the voltage meter. A Simplified validation was performed to test the methods linearity, lower limit of quantification, reproducibility, accuracy, matrix effects, robustness and internal standard recovery. In addition, a direct comparison was made between the detectors by testing the comparability between the instruments. The measurements from Xevo TQ-XS were verified based on validation requirements set by the laboratory’s Science and Development-section, using international standards. The results show linearity (R>0.9998) in the concentration ranges for all analytes and the lower limit of quantification may be kept as the signal/noise-ratio is well within the requirements. Furthermore, the results have shown that both accuracy and reproducibility for the method meets all requirements. When adjusted for with internal standards, the matrix effects are as good as non-existing, and the method’s robustness satisfies the requirements for shift of internal standard-area within a single analysis series. The results also show that the variation of internal standard-area is within acceptable deviations, established with the older detector. In addition, the direct comparison between the instruments, using regression analysis shows that there are no signs of systematic deviation between the instruments in terms of accuracy. The study has shown that the detector, Xevo TQ-XS, can be used for quantitative analysis of amphetamines and ritalinic acid in serum on UPLC-MS/MS.